期刊简介
本刊是反映本校科研、医疗工作及同国内外医学界交流的重要窗口，在编排上达到了规范化的要求，注意适应国内外文献检索系统收录的需要并逐步完善，成为一本具有较高水平的医学科学技术性刊物。
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首页>中国医科大学学报杂志
- 杂志名称：中国医科大学学报杂志
- 主管单位：辽宁省教育厅
- 主办单位：中国医科大学
- 国际刊号：0258-4646
- 国内刊号：21-1227/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1997年中共中央宣传部第二届全国优秀科技期刊三等奖期刊收录：农业与生物科学研究中心文摘, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美)
钙调蛋白镁结合位点突变体载体的构建、表达纯化及鉴定
赵美眯；李卓；邵冬雪；梁洪玥；晏珊；封瑞；孙雪菲；郭凤；郝丽英
关键词：钙调蛋白, 突变体, 融合蛋白, pGEX-6P-3
摘要：目的：构建钙调蛋白3种镁离子结合位点突变体的质粒载体，并进行表达纯化及鉴定，为深入研究钙调蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用钙调蛋白cDNA进行点突变，制备3种镁离子结合位点突变的cDNA。将突变后的cDNA分别插入pGEX?6P?3载体，制备钙调蛋白突变体载体质粒。质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞，培养大肠杆菌，并诱导GST融合蛋白表达。利用Glutathione?Sepharose 4B珠子和PreScission蛋白酶分离纯化蛋白。结果酶切鉴定和DNA测序证实成功构建钙调蛋白突变体质粒；表达纯化得到的钙调蛋白突变体经电泳图鉴定纯度较高，浓度约1.0 mg/mL。结论本研究成功构建了钙调蛋白镁结合位点突变体融合蛋白原核表达质粒，分离纯化可获得较高浓度较高纯度的钙调蛋白突变体。
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