期刊简介
本刊是反映本校科研、医疗工作及同国内外医学界交流的重要窗口，在编排上达到了规范化的要求，注意适应国内外文献检索系统收录的需要并逐步完善，成为一本具有较高水平的医学科学技术性刊物。
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首页>中国医科大学学报杂志
- 杂志名称：中国医科大学学报杂志
- 主管单位：辽宁省教育厅
- 主办单位：中国医科大学
- 国际刊号：0258-4646
- 国内刊号：21-1227/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1997年中共中央宣传部第二届全国优秀科技期刊三等奖期刊收录：农业与生物科学研究中心文摘, 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 剑桥科学文摘, 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美)
钙调蛋白N2和C2突变体载体的构建、表达纯化和鉴定
晏珊；雷帅；陈思充；于佳慧；祝旭东；孙嘉瑶；杜逸；李墨；唐子鉴；郝丽英
关键词：钙调蛋白, N?lobe, C?lobe, N2, C2, pull?down实验
摘要：目的 构建钙调蛋白(CaM)N2和C2突变体的表达性载体,表达纯化并进行活性鉴定,为进一步研究CaM与钙通道片段的相互作用奠定基础.方法 将CaM的N?lobe和C?lobe的cDNA分别与相应的N?lobe和C?lobe的cDNA相连,制备N2和C2突变体的cDNA.将N2和C2的cDNA分别插入pGEX?6p?3载体,并将重组质粒转入E.coli BL21菌株,IPTG诱导转化成功的菌株表达GST融合蛋白,超声破碎法提取,GS?4B beads纯化,SDS?PAGE电泳鉴定目的蛋白相对分子质量及纯度,pull?down实验鉴定活性.结果 酶切鉴定以及DNA测序结果证实重组质粒构建成功;SDS?PAGE电泳图显示突变体蛋白纯度和浓度均较高;pull?down实验结果证明突变体蛋白有生理活性,能与钙通道片段结合.结论 本研究成功构建了N2和C2表达质粒,并提取、纯化了有活性的钙调蛋白N2和C2突变体.
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